Nghiên cứu xây dựng phương pháp định tính, định lượng deoxyarbutin và hydroquinon trong kem bôi da mỹ phẩm bằng HPLC-DAD

Development of Qualitative and Quantitative Methods for Deoxyarbutin and Hydroquinonein Cosmetic Skin Creams Using HPLC-DAD

Lê Thị Hường Hoa, Trường Đại học Hòa Bình, Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương, Hà Nội, Việt Nam 100000

Vũ Thị Ngọc, Trường Đại học Hòa Bình

Nguyễn Thị Thu Linh, Trường Đại học Hòa Bình

ThS. Đỗ Thu Trang, Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương

Ngày nhận: 04/6/2025

Ngày nhận bản sửa: 18/6/2025

Ngày duyệt đăng: 24/6/2025

Tóm tắt

Một qui trình phân tích xác định đồng thời Deoxyarbutin (dA) và Hydroquinon (HQ) trong kem bôi da mỹ phẩm bằng phương pháp HPLC-DAD đã được thiết lập với kỹ thuật chiết bằng dung môi, ly tâm lạnh, lọc.

Chất cấm Deoxyarbutin và Hydroquinon được chiết tách ra khỏi nền mẫu kem bằng kỹ thuật chiết bằng dung môi, ly tâm lạnh, lọc. Dịch lọc được đưa vào phân tích trong máy HPLC, detector PDA với các điều kiện phân tích như sau: Cột sắc ký: Phenomenex Luna C18 (250 x 4,6 mm, 5µm), pha động là hỗn hợp của methanol – nước (50:50), tốc độ dòng 1 mL/phút, phát hiện bởi detector PDA ở bước sóng 285 nm.

 Kết quả thẩm định phương pháp cho thấy, phương pháp có độ đặc hiệu cao (LOD = 0,097µg/ml với HQ và 0,190µg/ml, có giới hạn định lượng nhỏ (LOQ = 0,321µg/ml với HQ và 0,628µg/ml với dA), khoảng tuyến tính khá rộng (0,32 µg/ml – 3,2 µg/ml đối với HQ và 0,63 – 6,3 µg/ml đối với dA), có độ đúng cao (94,01% – 104,37% với HQ và 97,21% – 99,39% với dA), độ lặp lại tốt với giá trị CV% nhỏ (RSD lớn nhất của tR: 0,376% với HQ và 0,183% với dA; RSD lớn nhất của Spic là 2,46% với HQ và 2,98% với dA), thời gian phân tích sắc ký vừa phải (25 phút cho một lần tiêm mẫu). Phương pháp đưa ra đã đáp ứng các yêu cầu của phương pháp phân tích các chất có nồng độ nhỏ của AOAC.

Từ khóa: Deoxyarbutin và Hydroquinon, định lượng chất cấm dA, chất làm trắng dA, HPLC- dA và HQ.

Abstract

A simultaneous analysis procedure for the determination of Deoxyarbutin (dA) and Hydroquinone (HQ) in cosmetic skin creams has been established using High-Performance Liquid Chromatography with Diode Array Detection (HPLC-DAD).

The banned substances Deoxyarbutin and Hydroquinone, were extracted from the cream sample matrix by using solvent extraction, followed by cold centrifugation and filtration. The filtrate was subjected to HPLC analysis using a PDA detector under the following conditions: Chromatographic column: Phenomenex Luna C18 (250 x 4.6 mm, 5µm), mobile phase: a 50:50 mixture of methanol and water; flow rate 1 mL/min, detection wavelength: 285 nm.

The method validation results indicated that the procedure exhibits high specificity with limits of detection (LOD) of 0.097µg/ml for HQ and 0.190µg/ml and and 0.190 µg/mL for dA. The method also has a low limit of quantification (LOQ) of 0.321 µg/mL for HQ and 0.628 µg/mL for dA, along with a broad linear range of 0.32 µg/mL to 3.2 µg/mL for HQ and 0.63 µg/mL to 6.3 µg/mL for dA. The accuracy is high, ranging from 94.01% to 104.37% for HQ and 97.21% to 99.39% for dA. Repeatability is also satisfactory, with a maximum relative standard deviation (RSD) of 0.376% for HQ and 0.183% for dA, and a maximum RSD for spiking of 2.46% for HQ and 2.98% for dA. The chromatographic analysis time is reasonable, taking 25 minutes per sample injection. The proposed method meets the analytical requirements for detecting low concentrations as outlined by AOAC standards.

Keywords: Deoxyarbutin, Hydroquinone, Quantification of banned substances dA, Whitening agents dA, HPLC- dA and HQ.

Toàn văn